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技術文章
更新時間：2025-12-09
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阿爾茨海默病（AD）作為亟待攻克的神經退行性疾病，其核心病理特征是 β- 淀粉樣蛋白（Aβ）在腦內異常沉積，而血腦屏障（BBB）功能障礙是導致 Aβ 清除受阻的關鍵誘因。近期，四川大學華西醫院協同國際團隊在《Signal Transduction and Targeted Therapy》（IF= 52.7）發表的重磅研究，提出了一種全新的納米治療策略 —— 通過 A??-POs 納米載體調控 BBB 上 LRP1 受體的運輸通路，實現 Aβ 的快速清除與認知功能的長期恢復。
01. 研究三大突破
該研究實現了三大關鍵突破：2 小時內清除 AD 模型小鼠腦內近 45% 的 Aβ、修復 BBB 運輸功能、認知改善效果持續 6 個月。而這一系列突破性結論的背后，離不開精準可靠的實驗技術支撐 —— ProteinSimple Jess 自動化數字 Western blot 系統，其在腦部分離組分純度驗證中的核心應用（Figure S12），為研究機制的嚴謹性提供了關鍵數據保障。
02. 核心技術支撐：Jess 系統在實驗中的關鍵應用
在 AD 病理機制研究中，腦內血管與實質組織的精準分離是解析 BBB 運輸功能的前提。研究團隊采用葡聚糖密度梯度法分離小鼠腦組織的血管組分與實質組分后，需通過特異性標志物驗證分離純度，以確保后續 Aβ 運輸、受體表達等實驗數據的準確性 —— 這一關鍵驗證步驟正是通過 Jess 系統完成。
03. 數據解讀：分離組分純度的精準驗證
(1) 實驗設計：
針對分離后的腦血管組分與實質組分，分別檢測內皮細胞標志物（CD31）、周細胞標志物（CD146）和神經元標志物（NeuN）的表達水平。
(2) Jess 系統檢測結果：
• 血管組分中，CD31 和 CD146 的條帶信號強、灰度值峰面積顯著高于實質組分，表明血管組織分離完整；
• 實質組分中，神經元標志物 NeuN 的信號占優，而血管標志物信號微弱，證明分離過程未發生明顯交叉污染；
• 條帶圖像清晰無拖尾，灰度值定量數據重復性好（n≥3），為后續 LRP1、PACSIN2 等蛋白的精準定量奠定基礎。
04. Jess 系統的技術優勢：為何成為該研究的優選工具？
(1) 自動化操作，避免人為誤差
傳統 Western blot 需手動完成制膠、電泳、轉膜、孵育等多步操作，而 Jess 系統實現全流程自動化，減少實驗人員操作差異，確保數據穩定性 —— 這對于腦部分離這類樣本量少、處理復雜的實驗至關重要。
(2) 微量樣本檢測，適配珍貴組織
AD 模型小鼠腦組織稀缺，分離后的血管 / 實質組分樣本量極微。Jess 系統僅需 3μL 樣本即可完成檢測，遠低于傳統 Western 的樣本需求量，盡可能利用珍貴實驗材料。
(3) 精準定量，超越定性分析
通過 Compass for Simple Western 軟件實現灰度值峰面積的精準計算，提供定量數據而非傳統 Western 的定性 / 半定量結果，滿足研究中 “組分純度量化驗證" 的嚴格要求。
(4) 高分辨率分離，標志物區分清晰
采用 12-230 kDa 分離模塊，成功區分 CD31（~135 kDa）、CD146（~75 kDa）、NeuN（~50 kDa）等不同分子量的標志物，條帶分辨率高、無重疊干擾。
05. 總結與展望
ProteinSimple Jess 自動化數字 Western blot 系統以其 “微量樣本適配、自動化操作、精準定量" 的技術優勢，成為該 AD 突破性研究中重要的技術支撐，其在本研究中完成的腦部分離組分純度驗證，為整個研究的機制解析提供了可靠的數據基礎。
在神經退行性疾病研究中，樣本稀缺、機制復雜、定量要求高是普遍挑戰，而 Jess 系統恰好針對性解決了這些痛點。隨著納米醫學、血管靶向療法等新興領域的發展，Jess 系統將持續為腦科學研究、疾病機制解析、創新療法驗證提供精準可靠的技術支持，助力更多像 A??-POs 納米療法這樣的突破性成果落地，為 AD 等難治性疾病的治療帶來新希望。
* 本文轉載自「ProteinSimple」微信公眾號
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